Cyber Dacha

Е77 готов Вот и закончена работа на сегодня. Вернулся где-то к 23 часам. И так почти каждую субботу. Раскидал 100 семян. На фотках внимательные могут заметить буквы ВВ и ВН. Это у меня опыление растений между разными сортами. Один я называю Высоким, а второй — Низким. Настоящие названия сортов мне неизвестны, хотя есть основания полагать, что оба из ветки Mazuma. Так вот, ВВ — это опыление Высого Высоким, а ВН — Высокого Низким. Не то чтобы я тут какой-то селекцией занялся. Просто семян ВВ оказалось только 50, а мне для достоверности результатов эксперимента хотелось побольше данных собрать, поэтому докинул ещё 50 ВН. А проверяю я в этом эксперименте следующие гипотезы: 1. После высадки на среду семена имеет смысл отправить в холодильник ещё на 10 дней, т.к. стратифицировал я их не в супервлажном состоянии. Японцы обычно оставляют семена на пару месяцев под холодной проточной водой. У меня такой возможности нет. А если просто оставить нежные семена на такой длительный срок во влаге, то они к концу срока истлеют. Поэтому есть основание полагать, что нахождение уже в стерильных условиях во влаге и в прохладе даст лучший процент всхожести. 2. Сравниваю разную тару для проращивания в стерильных условиях: обычные соусники на 30 мл, планшет на 24 небольших лунки, зип-пакет с воздушным фильтром, стеклянная чашка Петри.

Сколько времени занимают подобные эксперименты? Обычно я стартую все приготовления где-то в 12-13 часов дня и возвращаюсь домой из лабы в 20-24 часа, в зависимости от трудоёмкости процесса. Если надо ковырять меристему под микроскопом, а эксплантов я набрал целую кучу, то процесс может затянуться, а если просто пересадить экспланты на свежую среду, то гораздо быстрее.

Как проходят мои эксперименты с in-vitro Сегодня суббота, а это значит, что я еду в свою лабу ставить очередной эксперимент. Почти все семена васаби я распродал, но и себе немного оставил. Пришла пора их высадить в стерильных условиях. Все приготовления, которые можно сделать без стерильных условий я произвожу дома, попивая кофеёк: мою посуду, готовлю среду, автоклавирую всякое, подготавливаю экспланты и пр. Потом собираю всё в сумки и еду к ламинару, который находится в бытовке в Путилково. Список дел при приготовлении обычно довольно большой, поэтому, чтобы ничего не забыть, я разбиваю его на тудушки. А т.к. работа по большей части шаблонная, то очень удобно копировать тудушки с прошлого эксперимента и вносить правки под текущий эксперимент. По каждому эксперименту я веду журнал, что именно планирую сделать. А по итогам записываю, что получилось. Вот так, например, выглядит сегодняшний день (это копипаста из моего блокнота, решил ничего не править): ### E77 15.08.26 Сажаем семена, собранные с сорта васаби из трубы, который я считаю высоким. Опылял это растение от другого, которое тоже называю высоким. Семена были в закрытом соуснике в нулевой зоне холодильника около двух месяцев. Семена в собственной шелухе. Дополнительно не увлажнял. Сажаю в 4 тары: петри 70 мм, соусник 30 мл, зип-пакет с вентиляцией, планшет на 24 лунки Среда: 1/2 MS, 100% витаминов, сахар 10 г/л, без гормонов - После высадки отправляю снова в холодильник на 10 суток в нулевой зоне, - затем плавно поднимаю до максимума холодильника еще на 7 дней - Затем переношу в коридор, где температура 20 градусов E77 — это порядковый номер эксперимента. Это значит, что до этого я провёл уже 76 экспериментов. Если происходит пересадка эксплантов внутри эксперимента, то к числу добавляется суффикс. Например, когда я пересажу Е77 на свежую среду, то будет E77.1 А вот так выглядит список дел для E77. Тоже копипаста из блокнота, т.е. список чисто для себя. Многие очевидные мне вещи тут опущены, некоторые, возможно вам будут непонятны, но цель расписывать весь процесс я перед собой тут не ставлю — это достойно отдельной статьи. ### E77 15.08.26 - [ ] Помыть колбы и все петри - [ ] Стерилизация петри в духовке - [ ] Помыть автоклав - [ ] Залить воду. 4 банки + 1 банка 110 мл - [ ] Автоклав 1 - [ ] Вода 4 банки - [ ] 1 банка с водой для цефотаксима - [ ] 1 банка для гипохлорана 110 мл - [ ] 1 банка побольше, куда вылью среду для лунок в планшете - [ ] Запустить стерилизацию лабы + сухожар - [ ] Почистить семена - [ ] Калибровка pH-метра + предварительно отмыть от грязи - [ ] Приготовить среду - [ ] Дюшефу 0.66 л - [ ] Сахар 6.6 (10 г/л) г - [ ] Гельрит 1.45 г (2.2 г/л) - [ ] Смесь MS 1.45 г (2.2 г/л) - [ ] Вит 33 мг (50 мг/л) - [ ] MES 0.33 (0.5 г/л) - [ ] KOH До кипячения доводим до pH 6.0 - [ ] Проветривание лабы запустить - [ ] Автоклав 2 - 20 мин, 121 - [ ] Среда - 0.33 л х2 - [ ] Фильтр 1 шт - [ ] Заварочники - [ ] Пакеты с вентиляцией - 4 - [ ] Соусники 15 шт - [ ] С собой - [ ] петри м - [ ] Семена - [ ] Банки - [ ] Вода - [ ] среда - [ ] Фильтр - [ ] Цефотаксим - [ ] Перекись 3% - [ ] Гипохлоран - [ ] Соусники - [ ] Планшет - [ ] Зип-пакеты - [ ] б пинцеты 2 - [ ] Шприцы - [ ] Процесс - [ ] остудить среду очень хорошо - [ ] Разводим антибиотик - [ ] Готовим гипохлорит 0.5% 20 мл / 110 мл + несколько капель твин 20 - [ ] Среда - [ ] Цефотаксим 1.65 мл (500 мг/л) **Через фильтр** - [ ] Разливаем по банкам - [ ] Стерилизация - [ ] Спирт 70% - 20 сек - [ ] Гипохлоран 0.5% - 8 мин - [ ] Перекись 3% - 1 мин - [ ] Промывка 3 раза - [ ] Высадка Пунктов довольно много, и важно ничего не пропустить. Особенно больно уехать в лабу и забыть что-то важное дома. Поэтому я стараюсь тщательно следить за списком вещей, которые нужно взять с собой.

Климат для васаби Решил климат для васаби привести в порядок. Я его и раньше старался поддерживать, но разброс по температуре и влажности воздуха у меня был очень большой. Зимой бывало слишком сухо, а летом, в жаркие дни, слишком жарко. Мой мобильный кондиционер совсем не справлялся со своей работой (выкину его завтра нафиг), а ещё активно выдувал из помещения воздух, который я старался увлажнять. На съёмной квартире стены сверлить нельзя, поэтому поставил оконный кондей. Работает значительно эффективнее мобильного, хотя воздух тоже осушает, но не так сильно, как мобильный. Хочу держать на постоянке температуру воздуха 20-24°C и влажность 60-70%. На графике видно, что температура 7 августа стабилизировалась. Чуть позже влажностью займусь.

Рассада васаби А в подвале поспевает рассада из кусочков корневища. Подвал - очень комфортное по климату место для её разведения. Изначально хотел высадить её в новую коридорную установку, но теперь планирую отдать это место саженцам из in-vitro, которое надеюсь в ближайшие месяцы получить. Подвальные саженцы готов продать. Если есть желающие купить - пишите в личку. К сожалению, только Москва. Самовывоз или Яндексом. С дальними расстояниями пока не готов экспериментировать, высок шанс, что не доедут живыми.

Микроклональное размножение васаби. Успехи. Дела-то налаживаются! Сделал очередную пересадку. На прошлой коэффициент размножения (k) был около 1.0. С того момента я начал подбирать состав среды для улучшения результата. В частности, сравнил две концентрации гормонов 6-BAP. При концентрации 0.1 мг/л k=1.6, при концентрации 0.2 мг/л k=2.0. Наконец-то число моих эксплантов увеличивается. Сейчас их 114. Но k=2.0 всё ещё мало, на практике у взрослых ребят k>3. Перехожу от этапа выживания к этапу повышения качества. Одна из вещей, которые сейчас напрягают - непропорционально мелкие листья, по сравнению с черешками. Причина мне не известна. ChatGPT советует поработать над вентиляцией в банке и попробовать полный состав среды Мурасиге-Скуга (я с самого начала на 1/2 работаю, т.к. в некоторых научных работах используют половинную концентрацию). Хотя тут не отказался бы от совета специалиста.

Освещение для васаби Неспешно собираю новую установку для васаби на 30 кустов. На днях приехал свет от Никиты (Gustaff led). Часть светильников будет 5000К + 660 нм 10%, а другая часть — 5000К + 440 нм 10%. Проведу небольшое сравнение. В прошлый раз я заказывал только 5000К + 660 нм 10% и получил интересный эффект: кусты васаби выросли довольно компактными, хотя я знаю, что этот сорт у меня раньше давал очень крупные листья с длинными черешками. Компактность — ценное свойство при вертикальном выращивании, если не мешает росту корневища, конечно. В общем, рабочее предположение, что это влияние освещения, хотя не исключаю и другие факторы. Хорошо было бы ещё в одних и тех же условиях более теплый спектр попробовать, но подумал я об этом слишком поздно. Отдельный респект ещё выражу Никите за то, что у него можно по адекватной цене заказать кастомные варианты освещения. Без этой опции я бы поленился ставить эксперимент.