Лабиринты гистотехнологии

Коллеги, добрый вечер! После небольшого перерыва, новый пост уже на канале😉 https://max.ru/c/-70997338876475/AZ3JdcHqSF4

Коллеги, присоединяйтесь к конференции с отличной командой патологов, которая пройдет в Ташкенте 1-2 мая https://t.me/ipsum_tests/60?single

Друзья, как и обещала - новый пост❤️ https://max.ru/c/-70997338876475/AZ0-0uDyT6w

Друзья, первый пост на новом канале уже готов❤️ Поделитесь опытом, делаете ли вы такие исследования в своей лаборатории😍 https://max.ru/c/-70997338876475/AZ0gK_IeDDg

Друзья, коллеги, подписчики!🤗🤗🤗 Пришел момент и нашему каналу переезжать в МАХ. Ценю каждого из вас😍🤗 и очень жалко будет потерять😭 Поэтому, подписывайтесь на канал и будем на связи🤗 https://max.ru/join/JOKGeaMFR1uDeiTF-oFH7jAuGCE5abgvUNGTb6ayCaw P.S. А еще очень приятно получать от вас сообщения с вопросом о дальнейшей судьбе канала, очень ценю🥹🥹🥹 Канал будет, но на новой площадке, подписывайтесь🤗

Девочки, с праздником, нас!😘 Пусть у нас все будет хорошо, удачи, любви и терпения нам!😍😂🥳

Добрый день, друзья! Вот и завершилась стажировка коллег из Калининградской области❤️ Очень надеюсь, что и я к вам загляну, но позже😉 Что разобрали и освоили: ✅ Обработка материала от фиксации до изготовления стекла; ✅ Приготовили реактивы и разобрали окраску гематоксилин-эозин; ✅ Приготовили реактивы и разобрали окраску Азур-2-эозин; ✅ Приготовили реактивы и разобрали окраску серебра по Гордону-Свитсу; ✅ Освоили навыки работы с иммуностейнером Ventana Ultra; ✅ Познакомились с иммуностейнером Dartmon; ✅ И, конечно же,  разобрали все вопросы, которые возникали в ходе работы. Ну и итог🥳 Девочки - молодцы, слушали внимательно, выполняли все четко и профессионально. Успехов на местах!💜💜💜

Добрый день, коллеги!👋👋👋 Ровно такое сообщение я сегодня получила от коллеги из другой страны после очередной консультации и рекомендации проводки материала БЕЗ масла и промежуточных сред!😄 И тем самым сэкономила коллегам: ✅ Финансы, которые можно потратить на другую реагентику; ✅ Количество ТО (потому что при использовании промежуточных сред трубки забиваются быстрее и ТО нужно проводить чаще); ✅ Труд лаборантов, т.к. смена реагентики без масел более чистая и менее токсичная. Да-да, я расширяю границы😄😄😄😉 Спасибо за обратную связь🫶🫶 Если вам нужна консультация, вы всегда можете написать мне или здесь, или в ЛС💜

Друзья, с Новым 2026 годом!🥂 Пусть все задуманное исполнится🙏🥳🤗 Побольше радости, счастья, успехов вам и вашим близким🥳🥳🥳

Добрый день, коллеги!🤗 "Завтра" - занятулось неприлично долго, а причина всему очень простая, за 2 недели не было и минутки свободной🫣 Сегодня посмотрела и ужаснулась, за полторы недели 1️⃣0️⃣0️⃣ fish отсмотрено, и это НЕ считая моей другой нагрузки🥵🥵🥵 Но, я справилась🤪 Итак, второй день: 1️⃣. Достаем из инкубатора "матрасик", аккуратно перемешиваем, переливаем в центрифужную пробирку и отправляем на карусели центрифугируем 6 мин 1600 об/мин; 2️⃣. Отбираем надосадочную жидкость и добавляем 4мл среды RPMI (предварительно набираем в шприц и кладем в термостат на 37°с) для отмывки, перемешиваем аккуратно и центрифугируем 6 мин 1600 об/мин; 3️⃣. Отбираем надосадочную жидкость, хорошо разбиваем осадок и добавляем гипотонический раствор (KCl 0.55%, готовим каждый день свежий и отправляем в термостат на 37°с) последобавления KCl пробирку ставим в инкубатор на 20мин; 4️⃣. Добавляем 500мкл фиксатора (метанол:уксусная к-та 3:1 соответствеено) - все чернеет - центрифугируем 8мин 1400 об/мин; 5️⃣. Убираем надосадочную жидкость, разбиваем осадок, добавляем до 8мл 3% уксусную к-ту (можно брать ту, что использовали ранее), центрифугируем 8мин 1400 об/мин; 6️⃣. Убираем надосадочную жидкость, разбиваем осадок, добавляем фиксатор до 7мл (аккуратно перемешать) - отправляем в холодильник +4°с на 10мин; 7️⃣. Центрифугируем 6 мин 1600 об/мин; 8️⃣. Убираем надосадочную жидкость, разбиваем осадок, добавляем фиксатор до 5мл (аккуратно перемешать) - отправляем в холодильник +4°с на 10мин. Если у вас получился грязный осадок - повторяем 8️⃣ пункт еще 1-2 раза - по ситуации. Капаем по 3-4 капли на стекло над водяной баней (кипяток), стекла достаем из морозилки. У нас стекла 2-3 пачки лежат просто в морозилке, их и используем, сушить сутки при комнатной температуре. Следующее напишу про окраску, т.к. есть много нюансов. С наступающим Новым годом😄❤️ Всегда рада вашим вопросам🤗🤗🤗

Добрый вечер!👋 Итак, друзья, переходим к методике кариологии по просьбам зала🫶🫶 Мы работаем исключительно с костным мозгом (отсюда картинка будет своеобразная не такая красивая, как при работе с лимфоцитами крови). 🔤🔤🔤🔤🔤 1️⃣Определяем клеточность. Для этого берем 3% уксусную кислоту и материал (костный мозг) в соотношении 10:1 (соответственно) и считаем, чтобы определить сколько внести материала, т.к. если у вас будет мало или много материала клетки могут либо недоделиться, либо переделиться🤷‍♀️ 2️⃣Используем "матрасики" они ОДНОРАЗОВЫЕ вносим 5мл среды (RPMI) и 1мл бычьей сыворотки, и материал бывает 50мкл, а бывает и 2,5мл ВСЕ ЗАВИСИТ ОТ КЛЕТОЧНОСТИ- закрываем крышкой, слабо, чтобы как раз СО2 проникал и тут случается волшебство🤩🤩🤩 3️⃣ Клетки делятся-делятся, но потом через 2,5-3,0 часа необходимо внести колхицин - аккуратно 40мкл (подбирается опытним путем, кто-то из коллег 25 вносит, кто-то 50) 4️⃣ Закрываем крышку, опять наполовинку и отправляем "матрасик на пляж", а точнее в наш СО2 инкубатор для дальнейшего культивирования и ждем, когда пройдет остаток 24 часов🧬💉🧪 Вторая часть действа наступает на следующий день, о которой я расскажу вам завтра🤗 ВНИМАНИЕ❗️ На каждом этапе обязательно соблюдаем стерильность, используем все только одноразовое и не забываем кварцевать ламинар❤️ За обратную связь буду очень благодарна🩷

Добрый день, коллеги!🤗 Очередной вопрос из зала😉 PAS-d или ШИК с амилазой. Можно покупать сухую амилазу, подбирать активность и разводить, а можно поступить очень просто - использовать слюну🤷‍♀️😁 Да-да, как мы все помним из курса биохимии, в слюне содержатся ферменты, которые способствуют расщеплению сложных углеводов, к которым как раз и относится гликоген, на который и направлен используемый метод окраски. 🧐Сам протокол: Депарафинизация дегидратация (з ксилола по 5 мин, 3 спирта по 3 мин.); Просушить срезы (аккуратно стряхиваем воду); Раствор йодной кислоты – 7 мин; Промыть в дист. воде; Амилаза (слюна) - 30 мин во влажной камере при 37°С; Промыть в дист.воде; Реактив Шиффа – 20 мин; Проточная вода – 10 мин (в случае, если нет сернистой воды); Гематоксилин Майера – 30 сек; Дегидратация, просветление, заключение принятым способом ✳️РЕЗУЛЬТАТ: ШИК-положительные компоненты – малиновые (цвет фуксии), ядра – синие (сине-фиолетовые) ❗️Если у вас нет возможности покупать наборы именно, т.к. они дороже, чем сам реактив Шиффа, то достаточно купить его (РУ есть), а йодную кислоту приготовить самим (0.5-1.0%). Не является рекламой.

Добрый день, коллеги!🤗🤗🤗 Итак, работаем по заявкам, что называется😉 Как и обещала, оборудование, которое необходимо для выполнения цитогенетических исследований (кариотип): 1️⃣Ламинарный (вытяжной) шкаф с УФ - 2шт у нас один - ламинар, в котором выполняем посадку и фиксацию образца, второй - вытяжной, где разводим фиксатор/гипотонический раствор и пр. для выполнения метода; 2️⃣СО2- инкубатор ОЧЕНЬ СУПЕР-ВАЖНО, чтобы он был именно СО2, да именно эти 5% газа очень влияют на деление клеток, можно, конечно, использовать обычный инкубатор, но рост будет крайне плохой; 3️⃣Обычный лабораторный микроскоп, буквально с 2-мя объективами (×20, х40) для подсчета клеточности в камере Горяева перед посадкой культуры; 4️⃣Центрифуга лабораторная, без всякого охлаждения, просто самая обычная, которая будет иметь ротор для пробирок объемом 10 мл; 5️⃣Холодильник лабораторный (обычный) обязательно с морозилкой; 6️⃣Сухожар (шкаф для стерлизации буферных растворов); 7️⃣Набор дозаторов, но, я допустим, предпочитаю пипетки пастера (стерильные), и лишь при необходимости внесения маленьких объемов используем дозаторы; 8️⃣Ну и король👑 всей этой истории - микроскоп🔬 с камерой и кариологической программой, в которой вы будете разбирать кариотипы.🥳🥳🥳 Если у вас остались вопросы, пожалуйста, пишите✍️✍️✍️

Коллеги, добрый вечер!🤗 Ооооочень долгий у нас перерыв получился😓 Но, все не зря, потому что я погрузилась в интересный и загадочный мир генетики🧬🧬🧬 Пока что ооооочень сложно, долго, но безумно интересно разбираться😍😍😍 Но, обязательно все получится, и буду делиться с вами интересными случаями. Здесь же мы видим трисомию 8-ой хромосомы. Этот пациент уже имеет диагноз МДС, и как раз трисомия 8 указывает на более высокий риск развития ОМЛ, а значит требует более тщательного наблюдения🧐🧐🧐 Если у вас появились вопросы или хотите разобрать какую-то тему/методику - пишите, будем разбираться вместе💛💛

Вот и подошли к концу наши рабочие дни на Сахалине👨‍💻👨‍💻👨‍💻. Ну, что ребята, это фантастика!🤷‍♀ 1️⃣Сама конференция, которая проходила на базе онкологического диспансера: информативные доклады, приятные коллеги, а что самое главное не было информационной перегрузки, и в голове все складывалось, а не "проходило мимо"! 2️⃣Организация, это не 10/10, это 100/10, за что спасибо организаторам💕 3️⃣ Сам город - это отдельная любовь💕 Чисто, ухожено, НЕ многолюдно, красиво, а главное - спокойно😌 Спасибо Сахалину за теплую погоду (ну ладно, почти теплую😂) и конееееечно вкусные рестораны🍴❤️ До новых встреч!😚😚😚

Друзья! У нас для вас маленький коллективный сюрприз🥳🥳🥳 Подробности по ссылке: https://t.me/CasereportPathology/6924 Основы гистотехнологии, а также используемые протоколы там тоже есть, налетайте🤗🤗🤗🤗

Добрый вечер, коллеги!⚡️⚡️⚡️ Коллеги, оооочень нужна ваша помощь🤗🤗🤗 Отзовитесь, пожалуйста, у кого есть и Dartmon, и Bond в лабораториях. Можно в комментариях, можно в ЛС🤗

Добрый день, коллеги!🤗 Ровно такой вопрос вчера прилетел ко мне. Итак, давайте разбираться по порядку. Но, для начала нам нужно определиться чего мы хотим?🤔 ✅️ Полная автоматизация; ✅️ Ручная методика. Давайте начнем с первых шагов обработки материала: 1️⃣. Фиксация и вырезка - для этого необходим вытяжной (или ламинарный) шкаф и набор инструментов для вырезки. 2️⃣. Гистологическая обработка (проводка) материала: при автоматизации проводочный аппарат, ручной метод - баночки и термостат с темпер =60°С (для пропитки парафином). 3️⃣. Заливка: Автомат - заливочная станция Ручной метод - водяная баня для расплавления парафина. 4️⃣. Резка: Микротом, если бюджет ограничен, то берем сухую резку и дополнительно водяную баню для расправления срезов. Если бюджет позволяет - берем автомат/полуавтомат (не важно) с водяной дорожкой и получаем более тонкие и качесивенные срезы. 5️⃣. Сушка: Здесь нет вариант автоматизации😄 Ставим стекла в штатив и сушим строго вертикально 15мин 60°С 6️⃣. В случае гистологического материала красим, автоматический покрасочник (в который поставили и забыли, если протокол стабилен и отработан), либо ручками по баночкам с секундомером. 7️⃣. ИГХ Автоматизация - иммуностейнер (их множество Ventana, Dartmon, Dako, Thermo, Bond и пр, что хотите). В случае ручной постановки очень желательно иметь РТ-модуль для демаскировки срезов. А далее можно систему и антитело наносить и руками, инкубация зависит от температуры: при комнатной- подольше, при 37°С - поменьше. 8️⃣. Заключение срезов под пленку/стекло: Автомат- покровочники; Ручной метод- покрываем стеклом от уголка к уголку, чтобы избежать пузырей. 9️⃣. Обязательно не забывываем про холодильники для хранения антител, очень желательно фармацевтические холодильники иметь, которые поддерживают более точную температуру 1️⃣🔤. Не забываем про набор дозаторов, которые необходимы, как при автоматизации, так и при ручной постановке. Если у вас остались вопросы, пишите, обязательно отвечу💜

Коллеги, добрый день!🥳🤩 Совсем недавно, на канале "Случай из практики" был разобран кейс с использованием антитела CD34. Клон этого антитела у всех один и тот же - QBEnd/10, но! Есть одно 🔤🔤 🧐 "Работоспособность" этого антитела после декальцинации крайне избирательна😓 В своей практике мы используем на всё, что не проходило декальцинацию - CD34 (QBEnd/10) (REF 790-2927, Ventana Medical System) великолепно красит всё мягкотканное и абсолютно отказывается работать на образцах, которые прошли декальцинацию🤷‍♀️ Ноооо, мы, конечно же, нашли выход!🧑‍💻 Для мягкотканного используем  диспенсер, который указан выше, а на материал прошедшей декальцинацию используем концентрат Novocastra NCL-L-END, он же и есть CD34. ✅Разведение: 1:100 ✅Система детекции: UltraView ✅Демаскировка: CC1 64мин ✅Инкубация а/т: 32мин А как у вас с использованием CD34, есть свои секретики?🫶 Не является рекламой

Вот и подошло к концу наше 3-х дневное обучение с коллегами-патологами с Дальнего востока🤗 Надеюсь, у них все получится после моего визита🙏. Конечно же и к нам всегда можно приехать или просто позвонить с вопросами, если чего-то не получается и вместе разобраться в проблеме. У вас замечательные гематологи, которые бывают далеко не везде (мои гематологи-вы тоже замечательные💛). До новых встреч🫶🫶 А уже утром 🛫 домой и любимая работа❤️